محیط کشت PDA (پوتیتو دکستروز آگار): اساس، کاربرد، ترکیبات

مقدمه‌ای بر محیط کشت PDA

پوتیتو دکستروز آگار (PDA) برای کشت قارچ استفاده می‌شود. PDA یک محیط عمومی برای مخمرها و کپک‌ها است که می‌تواند با اسید یا آنتی‌بیوتیک‌ها برای مهار رشد باکتری‌ها مکمل شود. محیط کشت PDA برای شمارش پلیت‌های مواد خوراکی، محصولات لبنی و تست لوازم آرایشی توصیه می‌شود. PDA را می‌توان برای رشد مخمرها و کپک‌های مهم بالینی استفاده کرد. وجود پایه غنی از مواد مغذی (تزریق سیب‌زمینی) باعث افزایش هاگ و تولید رنگ‌دانه در برخی درماتوفیت‌ها می‌شود.

اساس پوتیتو دکستروز آگار

محیط کشت PDA از دهیدراته و خشک شدن سیب‌زمینی و دکستروز تشکیل شده است و باعث تقویت رشد قارچ‌ها می‌شود. آگار به عنوان عامل انسجام اضافه می‌شود. بسیاری از روش‌های استاندارد از مقدار مشخصی از اسید تارتاریک استریل (10%) برای کاهش pH این محیط به ۰٫۱ ± ۳٫۵ استفاده می‌کنند و رشد باکتری را مهار می‌کنند. کلرامفنیکل به عنوان یک عامل انتخابی برای مهار رشد بیش از حد میکروارگانیسم‌های رقیب در نمونه‌های مخلوط عمل می‌کند و هم چنین امکان جداسازی انتخابی قارچ‌ها را فراهم می‌کند.

توجه: محیط اسیدی شده را دوباره گرم نکنید، حرارت دادن در حالت اسیدی باعث هیدرولیز آگار می‌شود.

موارد استفاده از PDA

• محیط کشت PDA برای تشخیص مخمرها و کپک‌ها در محصولات لبنی و غذاهای آماده استفاده می‌شود.
• همچنین ممکن است برای کشت مخمرها و کپک‌ها در نمونه‌های بالینی استفاده شود.
• PDA با TA (اسید تارتاریک) برای بررسی میکروبی مواد غذایی و محصولات لبنی توصیه می‌شود.
• PDA با کلر تتراسایکلین برای شمارش میکروبی مخمر و کپک در لوازم آرایشی توصیه می‌شود.
• PDA با کلرامفنیکل برای کشت انتخابی قارچ‌ها در نمونه‌های مخلوط توصیه می‌شود.

ترکیبات محیط کشت PDA

آماده سازی روش خانگی

توجه: ۲۰۰ گرم انفوزیون سیب‌زمینی معادل ۴٫۰ گرم عصاره سیب‌زمینی است.

آماده سازی با پودر محیط کشت ​​صنعتی

• طبق دستورالعمل پشت جعبه محصول اقدام شود

روش تهیه PDA

آماده کردن روش خانگی

1. برای تهیه انفوزیون سیب‌زمینی، ۲۰۰ گرم سیب‌زمینی خلال شده و پوست کنده را در ۱ لیتر آب مقطر به مدت ۳۰ دقیقه بجوشانید.
2. سپس به وسیله پارچه پنیرسازی، آب خارج شده از آن را که همان انفوزیون سیب‌زمینی است، جمع آوری کنید (از فرم خشک شده صنعتی آن استفاده کنید).
3. با دکستروز، آگار و آب مخلوط کنید و بجوشانید تا حل شود.
4. ترکیب حاصل را ۱۵ دقیقه در ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد اتوکلاو کنید.
5. بخش‌های ۲۰ تا ۲۵ میلی‌لیتری از آن را در پتری دیش‌های ۱۵ × ۱۰۰ میلی‌متری استریل بریزید.
6. pH نهایی = ۰٫۲ ± ۵٫۶

آماده سازی به کمک پودرهای محیط کشت ​​صنعتی

1. ۳۹ گرم پودر PDA صنعتی را به 1 لیتر آب مقطر اضافه کنید. (اعداد در برند های مختلف ممکن است متفاوت باشد)
2. در حین مخلوط کردن بجوشانید تا کاملاً حل شود.
3. ترکیب را به مدت ۱۵ دقیقه در ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد اتوکلاو کنید.

به‌علاوه به این محیط کشت، این مواد نیز ممکن است اضافه شود؛

•  PDA با کلرتتراسایکلین ، حاوی:

کلرتتراسایکلین: ۴۰٫۰ میلی‌گرم

• PDA با کلرامفنیکل حاوی:

کلرامفنیکل: ۲۵٫۰ میلی‌گرم

pH نهایی ۵٫۶ +/- ۰٫۲ در ۲۵ درجه سانتیگراد.

• PDA با TA حاوی:

اسید تارتاریک: ۱٫۴ گرم

pH نهایی ۳٫۵ +/- ۰٫۳ در ۲۵ درجه سانتیگراد.

ویژگی‌های کلنی روی محیط کشت PDA

پس از انکوباسیون کافی، کلنی‌های مستقل باید در نواحی رگه‌دار و متقابلاً در مناطق با تلقیح سنگین قابل مشاهده باشند.

آسپرژیلوس فلاووس: توده‌های پودری از هاگ‌های زرد مایل به سبز در سطح بالایی و طلایی مایل به قرمز در سطح زیرین.

پنی‌سیلیوم کریزوژنوم: سبز زیتونی با حاشیه سفید استریل در سطح بالایی و نارنجی تا قرمز، به صورت چروکیده در سطح پایینی.

جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید

02186073470

همچنین بخوانید:

• مانیتول سالت آگار (آگار MSA)
• سابورو دکستروز آگار (SDA): ترکیب، اساس، کاربرد، تهیه و مورفولوژی کلنی
• آگار SCA (نشاسته کازئین آگار): ترکیب، کاربردها، آماده سازی و تفسیر
• آگار شکلاتی (چاکلت آگار)

منبع

مترجم: مریم محجوب