دسته‌بندی نشده
آشنایی با تست های MIC و MBC
آشنایی با تست های MIC و MBC
حداقل غلظت مهارکندگی باکتری (MIC)
حداقل غلظت مهاری (MIC) کمترین غلظت یک ماده شیمیایی است ، معمولاً یک دارو ، که از رشد قابل مشاهده باکتری یا باکتری جلوگیری می کند.
حداقل غلظت باکتری کشی (MBC)
حداقل غلظت باکتری کشی (MBC) به حداقل غلظت یک داروی ضد میکروبی گفته می شود که باعث کاهش 3 لگاریتمی (9/99 درصد کشندگی) در اندازه تلقیح سوش باکتری استاندارد می شود. آزمایش MBC یک روش کارامد برای مقایسه فعالیت میکروب کشی چندین عامل ضد میکروبی در یک زمان است که از آن به منظور غربالگری استفاده می شود. پس از انجام تست های تعیین حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC)، می توان به کمک یک سری مراحل، MBC را تعیین کرد. تست MBC مکمل تست MIC است. MBC کمترین غلظت عامل ضد میکروبی است که سبب مرگ آن می شود در حالی که MIC کمترین غلظت ماده ضد میکروبی است که مانع رشد آن می شود.
به طور کلی، اگر میزان MBC از چهار برابر MIC کمتر باشد، آن عامل ضد باکتری به عنوان باکتری کش شناخته می شود. گاهی، MBC برخی از داروها بسیار نزدیک به MIC آن است. و اگر MBC داروی آزمایش شده در برابر میکروارگانیسم آزمایش شده ≧ 32 برابر MIC باشد، میکروارگانیسم نسبت به داروی آزمایش شده مقاوم است.
خلاصه ای از نحوه انجام تست MBC
- میکروارگانیسم کشت داده شده، پس از یک شبانه روز انکوباسیون، در محیط کشت آبگوشت مولر هینتون رقت داده می شود تا غلظت نهایی آن بین و cfu / ml شود.
- اگر میزان MIC ماده ضد میکروبی مورد نظر را می دانید، برای انجام تست MBC، استوک خود را با غلظتی 100 برابر MIC تهیه کنید.
- در لوله های آزمایش یا چاهک های میکروتیتر، رقت های 1: 1 از دارو تهیه می شود.
- کلیه رقت های تهیه شده، با حجم مساوی از میکروارگانیسم مورد نظر تلقیح می شوند.
- یک لوله یا چاهک کنترل مثبت و منفی برای هر میکروارگانیسم در تست تلقیح می شود تا میزان رشد میکروبی را در طول مدت انکوباسیون و استریل بودن محیط به کمک آن بررسی و تایید شود.
- مقداری از کنترل مثبت بر روی پلیت کشت داده می شود تا حد پایه باکتری ها مشخص شود.
- لوله ها یا پلیت میکروتیتر در دما و مدت زمان معین انکوبه می شوند.
- کدورت ایجاد شده، نشان دهنده رشد میکروارگانیسم است. MIC کمترین غلظتی است که در آن هیچ گونه رشد بصری از میکروارگانیسم مشاهده نمی شود.
- برای تعیین MBC، رقتی که به عنوان MIC انتخاب شد و حداقل دو رقت غلیظ تر از آن، به منظور تعیین تعداد باکتری زنده در آن، بر روی پلیت کشت داده شده و کلنی های آن بر اساس CFU / ml شمارش می شود.
- MBC کمترین غلظتی است که در مقایسه با MIC، 99.9% CFU / ml از سلول ها را کشته است.
مزایای تست MBC
- به کمک تست MBC می توان حداقل غلظت ماده ی ضد میکروبی مورد نظر، برای کشتن باکتری را تعیین کرد. لازم به ذکر است که مدت زمان مجاورت ماده ضد میکروبی با ارگانیسم مورد آزمایش در این روش، به مدت 18 ساعت می باشد که زمانی بسیار طولانی است. بنابراین، این آزمایش با صحت کامل میزان MBC را تعیین می کند.
- آزمون MBC ابزاری خوب و نسبتاً ارزان برای رتبه بندی تعداد زیادی از عوامل ضد میکروبی بر اساس توانایی کشندگی آن ها است. به همین دلیل برای اهداف غربالگری بسیار مناسب است.
- کنترل پارامترهای دخیل در تست MBC در محیط آزمایشگاه آسان است. بنابراین انجام مقایسه بین عوامل مختلف ضد میکروبی آزمایش شده در شرایط یکسان و بررسی تأثیرات آن ها روی میکروارگانیسم خاص بررسی شده، به راحتی انجام پذیر است.
معایب تست MBC
- تست MBC باید برای هر میکروارگانیسم به صورت جداگانه تعیین شود. زیرا داروی ضد میکروبی بر روی هر میکروارگانیسم تاثیر متفاوتی دارد بنابراین مقادیر MBC نیز متفاوت خواهد شد.
- به کمک تست MBC نمی توان غلظت ماده ضد میکروبی مورد نیاز برای ضد عفونی کردن میکروارگانیسم ها، با زمان مجاورت کوتاه (مانند 10 دقیقه) را به دست آورد.
- محیط های کشت مغذی مانند تریپتیک سویا می توانند بر مقدار MBC تأثیر منفی بگذارند. محیط کشت توصیه شده برای این تست؛ مولر هینتون مایع است.
همچنین بخوانید…
با سلام میخواستم بدونم آیا با استفاده از E test میشه مقدار حدودی MBCرو تعیین کرد؟
سلام، خیر نمیشه. نوار etest فقط مقدار mic رو گزارش میکنه
سلام وقت بخیر.در مورد تست MIC میخواستم بپرسم چگونه غلظت مورد نظرمون رو برای استوک باکتری و آنتی بیوتیک می سازیم.ممنون میشم راهنماییم کنین.
با سلام
استوک اصلی باید توسط یک ترازوی دقیق اندازه گیری و در حلال مورد نظر حل یا دیسپرس شود. مثلا برای تهیه انتی بیوتیک با غلظت 100 میلی گرم بر میلی لیتر شما باید 0.1 گرم انتی بیوتیک را وزن کرده و با حلال به حجم 1 میلی لیتر برسانید.
سلام
نوع کشتی که انجام میشه چه نوع کشتی هست؟ یعنی فقط محیط کشت و میکروارگانیزم با هم مخلوط میشن و در پلیت ریخته میشه و انکوباسیون انجام میشه؟ یا کشت خطی انجام میشه مثلا میکروارگانیزم رو محیط کشت خطی کشت داده میشه؟
باهم مخلوط شده و داخل انکوباتور قرار داده می شوند
برای تعیین MICاز چه ماده شیمیایی برای رقیق سازی استفاده می شود
برای تعیین حداقل غلظت بازدارنده (MIC) که نشان‌دهنده کمترین غلظت یک آنتی‌بیوتیک یا ماده ضدمیکروبی است که رشد یک میکروارگانیسم را در شرایط آزمایشگاهی متوقف می‌کند، معمولاً از حلال‌های مختلفی برای رقیق کردن آنتی‌بیوتیک استفاده می‌شود. انتخاب حلال مناسب بستگی به خصوصیات فیزیکی و شیمیایی آنتی‌بیوتیک دارد. در اینجا به برخی از رایج‌ترین حلال‌های استفاده شده در روش‌های تعیین MIC اشاره می‌کنم:
آب مقطر استریل: برای بسیاری از آنتی‌بیوتیک‌ها که در آب به خوبی حل می‌شوند، آب مقطر استریل یکی از ساده‌ترین و ارزان‌ترین حلال‌ها است.
دیمتیل سولفوکساید (DMSO): DMSO یک حلال عالی برای بسیاری از ترکیبات آلی است که در آب به خوبی حل نمی‌شوند. این ماده به دلیل توانایی حل کردن تعداد زیادی از ترکیبات و سازگاری خوب با سیستم‌های زیستی، بسیار محبوب است.
اتانول: برای برخی از آنتی‌بیوتیک‌ها و ضدمیکروب‌هایی که در DMSO یا آب حل نمی‌شوند، اتانول می‌تواند به عنوان حلال استفاده شود. اتانول همچنین می‌تواند به عنوان یک حلال استریلیزه‌کننده عمل کند.
بافر فسفات: گاهی اوقات برای حفظ pH محلول در طی آزمایشات MIC از بافر فسفات استفاده می‌شود، به ویژه زمانی که محیط رشد میکروبی به حساسیت pH دارد.
بافر سالین فسفات (PBS): این بافر نیز ممکن است برای رقیق‌سازی آنتی‌بیوتیک‌ها استفاده شود، به ویژه در مواردی که نیاز به حفظ تعادل یونی و pH دقیق است.
هنگام انجام آزمایش MIC، مهم است که از حلال‌هایی استفاده شود که با آنتی‌بیوتیک یا ماده ضدمیکروبی سازگار باشد و تأثیر نامطلوبی بر روی میکروارگانیسم‌های مورد آزمایش نداشته باشد. همچنین، باید توجه داشت که حلال‌ها باید استریل بوده و هیچ تأثیر میکروب‌کشی یا مهارکننده‌ای از خود نشان ندهند.
سلام . هزینه ازمایش mic و mbc بر روی ردی دو باکتری استافیلوکوکس اورئوس و اشرشیا کلی چقدر هست ؟
سلام، جهت استعلام قیمت و جزئیات با ما تماس بگیرید
مقدار باکتری که در هر لوله وارد میشه چتد میل هس؟
آیا باکتری های مورد نظر بر اساس نیم مک فارلند تغلیظ و ساخته میشه؟
اساس ساخت استوک دارو براساس چی هس؟
مقدار باکتری در هر لوله تست MIC و MBC: معمولاً بر اساس استاندارد نیم مک‌فارلند تنظیم می‌شود و پس از رقیق‌سازی، حدود 5 × 10^5 تا 5 × 10^6 CFU/mL می‌باشد.
ساخت استوک باکتری: بر اساس استاندارد 0.5 مک‌فارلند تهیه می‌شود.
ساخت استوک دارو: شامل وزن‌گیری دقیق آنتی‌بیوتیک، حل کردن آن در حلال مناسب، استریل کردن و نگهداری در دمای پایین است.
برای اطمینان از دقت و صحت نتایج، رعایت شرایط استریل و دقت در اندازه‌گیری‌ها ضروری است.
با سلام دوره عملی فیلم هم ضبط شده دارید که خریداری کنیم
سلام، ویدیو های آموزشی ما را در قسمت منو میتوانید رایگان مشاهده کنید
پایین بودن ۱۵۰۰ واحدکمتر WBCو RBC نشانه کدام سرطان است باتشکر
پایین بودن تعداد سلول‌های سفید خون (WBC) و سلول‌های قرمز خون (RBC) می‌تواند به دلایل متعددی رخ دهد و لزوماً نشانه‌ای از سرطان نیست. با این حال، در برخی موارد، تغییرات در تعداد این سلول‌ها می‌تواند با برخی از انواع سرطان‌ها، به ویژه آن‌هایی که مغز استخوان را تحت تأثیر قرار می‌دهند، مرتبط باشد. مغز استخوان نقش مهمی در تولید سلول‌های خونی دارد، و بیماری‌ها یا سرطان‌های مرتبط با آن می‌توانند تولید طبیعی سلول‌های خونی را مختل کنند. این شرایط عبارتند از:
لوسمی (سرطان خون): لوسمی‌ها می‌توانند باعث شوند که مغز استخوان سلول‌های سفید خون غیرطبیعی و بیش از حد تولید کند، که می‌تواند به کاهش تولید سلول‌های قرمز خون و سایر انواع سلول‌های سفید خون سالم منجر شود.
میلوم مولتیپل (نوعی سرطان مغز استخوان): این بیماری با تکثیر سلول‌های پلاسمایی غیرطبیعی در مغز استخوان مشخص می‌شود که می‌تواند مانع از تولید سالم سلول‌های خونی شود.
سایر بیماری‌های مغز استخوان مانند سندرم میلودیسپلاستیک که در آن مغز استخوان نمی‌تواند به طور مؤثر سلول‌های خونی سالم تولید کند.
با این حال، تغییرات در تعداد سلول‌های خونی می‌توانند به دلایل متعدد غیرسرطانی نیز رخ دهند، مانند عفونت‌ها، کم خونی، بیماری‌های خودایمنی، و استفاده از برخی داروها. بنابراین، مهم است که در صورت مشاهده تغییرات قابل توجه در آزمایش‌های خون، به پزشک مراجعه کنید تا ارزیابی‌های بیشتری انجام شود و علت دقیق این تغییرات مشخص شود. تشخیص زودهنگام و دقیق برای تعیین بهترین روش درمان بسیار مهم است.
سلام وقت بخیر .در مورد کنترل منفی و مثبت سوال دارم.آیا چاهک حاوی باکتری کنترل منفی است یا مثبت؟
سلام این مورد بستگی به خودتون داره. البته بیشتر موارد کنترل مثبت رو بدون باکتری در نظر میگیرن
تست mic و mbc باید در غلظت های مختلف از یک اسانس یا دارو یا هر ماده‌ی دیگری گرفته شود؟
سلام بله
برای انجام mic سریالی از غلظت های مختلف دارو باید تهیه و باکتری در هر یک از این غلظت ها بارگذاری شود