تا حالا امتیازی برای این مطلب ثبت نشده؛ با ثبت نظرتون مارو خوشحال میکنید
Arvin Esfandi
4 دیدگاه برای “استخراج DNA”
نگین گفته:
با سلام و وقت بخير و تشكر فراوان از اموزشهای عالیتون.
چند سوال در رابطه با استخراج DNA به روش فنول کلروفرم دارم ممنون میشم راهنمایی بفرمایید:
۱) در قسمتی که کلروفرم اضافه میکنیم به محلول حاوی DNA فرمودید باید به اندازه حجم محلول DNA، کلرفوم اضافه کنیم ما این محلول رو به کمک سمپلر از فنول جدا کردیم و در میکروتیوب جدید ریختیم اما چطور متوجه حجم این محلول بشیم؟ در بخشي که الكل پروپانول و سديم استات هم اضافه کردید فرمودید به نسبت 0.8 و 0.1 حجم محلول حاویی DNA این دو رو اضافه میکنیم ولی باز متوجه نشدم چطور حجم محلول حاویی DNA را محاسبه کنیم.
۲) چند بار DNA را با الکل ۷۰ درصد شست و شو میدهیم؟ دو یا سه بار؟
۳) در مرحله ای که بافر TE را اضافه میکنیم اول در dry block incubator میگذاریم و سپس بافر TE اضافه میکنیم یا برعکس؟ و دما ۵۶ درجه سانتی گراد و زمان ۲۵ دقیقه است درسته؟
با تشکر🌻🙏🏻
سلام وقت شما هم بخیر
1) منظور از حجم مایع میزانی از مایع رویی هست که شما به وسیله پیپت بر میدارین یعنی اگر برای مثال سه حجم 50 میکرولیتری برداشته اید بنابراین 150 میکرولیتر کلروفرم اضافه می کنید
2) دوبار با الکل 70 درصد شست و شو میدین
3) ابتدا در دستگاه قرار می دهید تا خشک شود سپس همانطور که در دستگاه قرار دارد بافر را اضافه نمایید حدودا 5 دقیقه زمان کافی است
در ضمن لطفا سوال های خودتون رو از این پس در بخش پرسش و پاسخ ما بپرسید
با سلام
ممنون ميشم مولاريته مربوط به مواد مورد استفاده در اين روش (استخراج با استفاده از فنول كلروفرم ) كه شامل بافر wB:Tris,sds,Edta و همينطور فنول , كلروفرم , سيديم استات و ايزوپروپانول رو بفرماييد
با سلام و احترام
ببخشيد سوالي ك در رابطه با استخراج dnaب روش فنول داشتم در نورد مولاريته و نرماليته مربوط ب مواد تشكيل دهنده هست ك ممنون ميشم راهنمايي كنين ك مولاريته ها ب چ مقدار بايد باشد
با تشكر
با سلام و وقت بخير و تشكر فراوان از اموزشهای عالیتون.
چند سوال در رابطه با استخراج DNA به روش فنول کلروفرم دارم ممنون میشم راهنمایی بفرمایید:
۱) در قسمتی که کلروفرم اضافه میکنیم به محلول حاوی DNA فرمودید باید به اندازه حجم محلول DNA، کلرفوم اضافه کنیم ما این محلول رو به کمک سمپلر از فنول جدا کردیم و در میکروتیوب جدید ریختیم اما چطور متوجه حجم این محلول بشیم؟ در بخشي که الكل پروپانول و سديم استات هم اضافه کردید فرمودید به نسبت 0.8 و 0.1 حجم محلول حاویی DNA این دو رو اضافه میکنیم ولی باز متوجه نشدم چطور حجم محلول حاویی DNA را محاسبه کنیم.
۲) چند بار DNA را با الکل ۷۰ درصد شست و شو میدهیم؟ دو یا سه بار؟
۳) در مرحله ای که بافر TE را اضافه میکنیم اول در dry block incubator میگذاریم و سپس بافر TE اضافه میکنیم یا برعکس؟ و دما ۵۶ درجه سانتی گراد و زمان ۲۵ دقیقه است درسته؟
با تشکر🌻🙏🏻
سلام وقت شما هم بخیر
1) منظور از حجم مایع میزانی از مایع رویی هست که شما به وسیله پیپت بر میدارین یعنی اگر برای مثال سه حجم 50 میکرولیتری برداشته اید بنابراین 150 میکرولیتر کلروفرم اضافه می کنید
2) دوبار با الکل 70 درصد شست و شو میدین
3) ابتدا در دستگاه قرار می دهید تا خشک شود سپس همانطور که در دستگاه قرار دارد بافر را اضافه نمایید حدودا 5 دقیقه زمان کافی است
در ضمن لطفا سوال های خودتون رو از این پس در بخش پرسش و پاسخ ما بپرسید
با سلام
ممنون ميشم مولاريته مربوط به مواد مورد استفاده در اين روش (استخراج با استفاده از فنول كلروفرم ) كه شامل بافر wB:Tris,sds,Edta و همينطور فنول , كلروفرم , سيديم استات و ايزوپروپانول رو بفرماييد
با سلام و احترام
ببخشيد سوالي ك در رابطه با استخراج dnaب روش فنول داشتم در نورد مولاريته و نرماليته مربوط ب مواد تشكيل دهنده هست ك ممنون ميشم راهنمايي كنين ك مولاريته ها ب چ مقدار بايد باشد
با تشكر