آگار ستریماید (Cetrimide Agar): ترکیب، اساس، کاربردها، آماده سازی و مورفولوژی کلنی

مقدمه‌ای بر آگار ستریماید

آگار ستریماید یک محیط انتخابی و افتراقی است که برای جداسازی و شناسایی سودوموناس آئروژینوزا از نمونه‌های بالینی و غیربالینی استفاده می‌شود. ستریماید عامل انتخابی است و با عمل به عنوان یک ماده گندزدا (دترجنت)، بیشتر باکتری‌ها را مهار می‌کند (Cetyltrimetylammonium bromide، یک آمونیوم چهارتایی، دترجنت کاتیونی)

همچنین به نام‌های سودوموناس آگار ستریماید یا سودوسل آگار نیز شناخته می‌شود.

ترکیبات آگار ستریماید

اساس آگار ستریماید

آگار ستریماید به عنوان یک محیط انتخابی برای جداسازی سودوموناس آئروژینوزا از چرک، خلط و غیره است. سودوموناس آئروژینوزا تعدادی شلاتورآهن محلول در آب تولید می‌کند، از جمله پیووردین فلورسنت زرد – سبز یا زرد – قهوه‌ای. هنگامی که پیووردین با پیوسیانین آبی محلول در آب ترکیب می‌شود، رنگ سبز روشن مشخصه سودوموناس آئروژینوزا ایجاد می‌شود.

هضم لوزالمعده ژلاتین، مواد مغذی لازم مانند نیتروژن، ویتامین‌ها و کربن را برای P. aeruginosa فراهم می‌کند.

افزودن کلرید منیزیم و سولفات پتاسیم باعث تحریک تولید پیوسیانین و پیووردین (فلورسین) می‌شود.

ستیل تری متیل آمونیوم بروماید (Cetrimide) عامل انتخابی است و با عمل به عنوان یک دترجنت، بیشتر باکتری‌ها را مهار می‌کند. در تماس با باکتری باعث آزاد شدن نیتروژن و فسفر از سلول باکتری‌هایی غیر از سودوموناس آئروژینوزا می‌شود.

گلیسرول به عنوان منبع کربن افزوده می‌شود.

آگار عامل انجماد است.

موارد استفاده از آگار ستریماید

1. آگار ستریماید عمدتاً برای جداسازی انتخابی و شناسایی احتمالی سودوموناس آئروژینوزا در نمونه‌های بالینی و غیربالینی استفاده می‌شود.
2. همچنین برای تعیین توانایی ارگانیسم برای تولید فلورسین و پیوسیانین (آنتی بیوتیک) استفاده می‌شود.

طرز تهیه

1. ۴۵٫۳ گرم از محیط کشت را به ۱ لیتر آب مقطر اضافه کنید.
2. ۱۰ میلی لیتر گلیسرول اضافه کنید و بجوشانید تا کاملاً حل شود.
3. محلول را با اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید.
4. محیط را تا حدود ۵۰ درجه سانتیگراد خنک کنید و در پتری دیش‌های استریل بریزید.

تفسیر نتایج بر روی آگار ستریماید

وجود رشد نشان دهنده یک واکنش مثبت است. کلنی‌ها را تحت نور فرابنفش با طول موج کوتاه (۲۵۴ نانومتر) از نظر وجود فلورسین بررسی کنید. بررسی بصری همچنین ممکن است رنگ معمولی زرد – سبز تا آبی را نشان دهد که نشان دهنده تولید پیوسیانین است. پیوسیانین و فلورسین، هر دو معمولاً توسط سویه‌های

1. aeruginosa تولید می‌شوند.

یک واکنش منفی با عدم رشد نشان داده می‌شود.

مورفولوژی کلنی بر روی آگار ستریماید

کنترل کیفیت در آگار ستریماید

سودوموناس آئروژینوزا ATCC 9027: کلنی‌های زرد-سبز تا آبی.

اشریشیا کلی ATCC 8739: مهار جزئی تا کامل. بدون رنگ‌دانه.

محدودیت آگار ستریماید

1. گاهی اوقات برخی از ترشحات روده‌ای باعث ایجاد مقدار کمی رنگ زرد در محیط می‌شوند. با این حال، این رنگ به راحتی از تولید فلورسین متمایز می‌شود؛ زیرا این زردی تولید فلورسانس نمی‌کند.
2. برخی از غیر تخمیر کننده‌ها و برخی از تولیدکنندگان هاگ‌های هوازی ممکن است رنگ‌دانه‌های برنزی مایل به قهوه‌ای محلول در آب را در محیط نشان دهند. سویه‌های Serratia ممکن است رنگ‌دانه صورتی نشان دهند.
3. مطالعات Lowbury و Collins نشان داد که aeruginosa می‌تواند خاصیت فلورسانس خود را در زیر اشعه ماورای بنفش از دست بدهد، البته اگر کشت‌ها برای مدت کوتاهی در دمای اتاق باقی بمانند. هنگامی که صفحات مجدداً انکوبه می‌شوند، فلورسانس دوباره ظاهر می‌شود.
4. آزمایشات بیشتر برای اثبات وجود aeruginosa ضروری است.

مطالعه بیشتر:

تست هیدرولیز نشاسته (Starch Hydrolysis Test): اصول، روش، موارد استفاده و تفسیر

EMB آگار: فرمول، اصول، آماده سازی، نتایج و موارد استفاده

منبع

مترجم: مریم محجوب