ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها، ویکی ژن
آگار YEPD: ترکیب، اصول، آماده‌سازی، نتایج و موارد استفاده
فهرست مطالب
نمایش
- مخمرها، یوکاریوت‌های (Eukaryote) تک سلولی هستند و در ژنتیک مولکولی به طور گسترده مورد مطالعه قرار گرفته‌اند.
- آن‌ها شیمیوارگانوتروف (Chemoorganotroph) هستند زیرا از ترکیبات آلی به عنوان منبع انرژی استفاده می‌کنند.
- آگار YEPD یا YPD برای نگه‌داری و تکثیر مخمرها از جمله ساکارومایسس سرویزیه ( cerevisiae) در روش‌های مختلف میکروبیولوژی مولکولی استفاده می‌شود.
- YPD به عنوان یک محیط کامل برای رشد مخمر عمل می‌کند.
ترکیبات آگار YEPD
| مواد تشکیل دهنده | گرم در لیتر |
| پپتون | 20 |
| عصاره مخمر | 10 |
| دکستروز | 20 |
| آگار | 15 |
pH نهایی (در دمای 25 درجه سانتی‌گراد): 0.2 ± 6.5
اصول آگار YEPD
- YEPD از عصاره مخمر، پپتون و گلوکز یا دکستروز تشکیل شده است.
- مخمرها در محیط کشت مینیمالی (Minimal medium) که فقط حاوی دکستروز و نمک باشد به خوبی رشد می‌کنند.
- افزودن پروتئین و هیدرولیزهای عصاره سلولی مخمر باعث رشد سریعتر در طول مرحله رشد نمایی یا لگاریتمی می‌شود.
- عصاره مخمر ویتامین‌های B کمپلکس را تامین می‌کند و حاوی تمام اسیدهای آمینه لازم برای رشد می‌باشد.
- پپتون به عنوان منبع نیتروژن، ویتامین‌ها و مواد معدنی عمل می‌کند.
- دکستروز به عنوان منبع کربن عمل می‌کند.
- این محیط، رشد زیاد گونه وحشی و همچنین گونه‌های جهش یافته انواع مخمرهای جوانه‌دار را تقویت می‌کند.
تهیه آگار YEPD
- 65 گرم از پودر را در 1 لیتر آب تصفیه شده بریزید.
- آن را کاملا مخلوط کنید.
- محیط آگار را با هم زدن مکرر حرارت داده و به مدت 1 دقیقه بجوشانید تا پودر کاملا حل شود.
- محیط آگار و براث (Broth) را در دمای 121 درجه سانتی‌گراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
- محیط را تا دمای 45 تا 50 درجه سانتی‌گراد خنک کنید.
- آن را به طور مساوی در پلیت‌های پتری (Petri plate) بریزید.
تفسیر نتیجه در آگار YEPD
| ارگانیسم‌ها | رشد |
| Kluyveromyces lactis | رشد بسیار زیاد |
| Saccharomyces cerevisiae | رشد بسیار زیاد؛ کلنی‌های صاف، مرطوب و درخشان |
| Candida albicans | رشد بسیار زیاد |
موارد استفاده از آگار YEPD
- YEPD به عنوان یک محیط رشد برای رشد کشت‌های مخمر استفاده می‌شود.
- برای رشد ساکارومایسس سرویزیه استفاده می‌شود.
- این محیط از رشد بیشتر میکروارگانیسم‌های هتروتروف (Heterotrophic) پشتیبانی می‌کند، اما به دلیل ترکیب ساده‌شان، به عنوان محیط پایه برای کشت معمول مخمرها به کار گرفته می‌شوند.
- برای تهیه محیط کشت در روش‌های میکروبیولوژی مولکولی استفاده می‌شود.
محدودیت‌های آگار YEPD
- این محیط یک محیط غیر انتخابی است.
- از آن‌جایی که YEPD یک محیط کامل است، نمی‌تواند به عنوان یک محیط انتخابی برای آزمایش اکسوتروف‌ها (Auxotroph) استفاده شود.
همچنین بخوانید:
- محیط کشت لوینتال (Levinthal’s Medium): ترکیب، اصول، روش آماده‌سازی، نتایج و موارد استفاده
- پتری دیش چیست؟ تعریف، قطعات، انواع، موارد استفاده
- محیط کشت لون اشتاین جانسون (LJ): ترکیب، اصول، روش آماده‌سازی، نتایج و موارد استفاده
- محیط کشت لوفلر (Loeffler Medium): ترکیب، اصول، روش آماده‌سازی، نتایج و موارد استفاده
مترجم: صادق حسینی‌کیا
