تست آکری-رزنهایم (Acree-Rosenheim Test): تعریف، اصول، روش، نتایج و موارد استفاده

تعریف تست آکری-رزنهایم

تست آکری-رزنهایم یک آزمایش بیوشیمیایی است که برای شناسایی مولکول‌های تریپتوفان در یک نمونه پروتئین استفاده می‌شود. تست آکری-رزنهایم یکی از تست‌های ضروری برای تایید وجود فرمالدئید (Formaldehyde) در شیر است زیرا فروشندگان شیر از فرمالدئید به عنوان نگه‌دارنده استفاده می‌کنند.

بنابراین این تست به فهم وضعیت نمونه شیر با مشخص کردن این که شیر فاسد شده است یا نه، کمک می‌کند. یک روش ساده‌تری نیز برای تعیین حضور فرمالدئید در شیر وجود دارد. در روش ساده‌تر، شیر را می‌توان فقط با چند قطره HCl غلیظ گرم کرد تا وجود فرمالدئید را آزمایش کرد. به تست آکری-رزنهایم، تست آلدئید (Aldehyde)  نیز گفته می‌شود زیرا این تست بر اساس تشخیص وجود مولکول‌های آلدئید در نمونه است. این تست به نام دو بیوشیمیست نام‌گذاری شده است. Solomon Farley Acree و Sigmund Otto Rosenheim.

اهداف تست آکری-رزنهایم

• برای تشخیص وجود تریپتوفان در نمونه پروتئین.
• برای تشخیص وجود فرمالدئید در نمونه.

اصول تست آکری-رزنهایم

شناساگر تست آکری-رزنهایم، فرمالدئید می‌باشد. از این تست برای شناسایی تریپتوفان در محلول پروتئین استفاده می‌شود. فرمالدئید اضافه شده به نمونه منجر به انجام واکنش تراکمی با دو مولکول تریپتوفان می‌شود. واکنش در شرایط اسیدی با افزودن اسید سولفوریک (H₂SO₄) انجام می‌شود که دو لایه مجزا را در لوله آزمایش ایجاد می‌کند. محصول چگال حاصل از واکنش بین تریپتوفان و فرمالدئید به رنگ بنفش است که نشان دهنده وجود مولکول‌های تریپتوفان است.

واکنش

تریپتوفان + فرمالدهید + تریپتوفان     ←      محصول چگال رنگی + H₂O

نیازمندی‌ها

شناساگرها

• نمونه پروتئین (تریپتوفان 1٪ یا سایر اسیدهای آمینه)
• فرمالدئید رقیق (CH₂O)
• اسید سولفوریک (H₂SO₄)

تجهیزات مورد نیاز

• لوله‌های آزمایش
• پایه لوله آزمایش
• پیپت‌ها (Pipette)

روش تست آکری-رزنهایم

1. حدود 2 تا 3 میلی‌لیتر محلول پروتئین را در یک لوله آزمایش بریزید. اگر قرار است از آلبومین تخم‌مرغ (Egg albumin) استفاده شود، محلول 5 تا 10 درصد باید تهیه شود.
2. به لوله آزمایش چند قطره فرمالدئید رقیق اضافه کنید.
3. سپی چند قطره اسید سولفوریک غلیظ از کناره لوله‌ آزمایش اضافه کنید.
4. برای جلوگیری از مخلوط شدن دو لایه باید از تکان دادن لوله آزمایش خودداری شود.
5. تشکیل حلقه بنفش رنگ را در محل اتصال دو لایه بررسی کنید.

برای نمونه‌های شیر با مواد نگه‌دارنده

1. در مورد نمونه‌های شیر، چند قطره اسید غلیظ (H₂SO₄) به آن اضافه کنید.
2. سپس این ترکیب حرارت داده می‌شود تا محلولی به رنگ بنفش به دست آید.

نتیجه و تفسیر تست آکری-رزنهایم

نتیجه مثبت: نتیجه مثبت تست آکری-رزنهایم با ظاهر شدن یک حلقه بنفش رنگ در محل اتصال دو لایه نشان داده می‌شود که نشان دهنده وجود تریپتوفان است.

نتیجه منفی: نتیجه منفی تست آکری-رزنهایم با عدم وجود حلقه بنفش در محل اتصال دو لایه نشان داده می‌شود.

موارد استفاده از تست آکری-رزنهایم

• از این تست برای تشخیص وجود پروتئین‌ها و اسیدهای آمینه متمایز در یک نمونه استفاده می‌شود.
• این تست، یک آزمایش استاندارد برای شناسایی تریپتوفان در نمونه است.
• نسخه اصلاح شده این تست نیز برای تشخیص وجود فرمالدئید در نمونه شیر استفاده می‌شود.

محدودیت‌های تست آکری-رزنهایم

• این تست فقط برای شناسایی تریپتوفان قابل استفاده است، بنابراین نتیجه منفی، وجود اسیدهای آمینه دیگر را رد نمی‌کند.
• ژلاتین (Gelatin) ممکن است تست آکری-رزنهایم منفی بدهد زیرا کمبود تریپتوفان دارد.
• تکان دادن لوله آزمایش می‌تواند منجر به مخلوط شدن دو لایه شود که ممکن است موجب ایجاد نتایج منفی کاذب شود.

همچنین بخوانید:

• تست هاپکینز کول (Hopkin’s Cole Test): تعریف، اصول، روش، نتیجه و موارد استفاده
• تست مالونات (Malonate Test): اهداف، اصول، روش و نتایج
• تست بارفود (Barfoed’s Test): تعریف، اصول، روش، نتیجه و موارد استفاده
• تست نیتروپروساید (Nitroprusside Test): تعریف، اصول، روش، تفسیر نتایج و موارد استفاده
• تست نین هیدرین (Ninhydrin Test): تعریف، اصول، روش، نتیجه و موارد استفاده

منبع

مترجم: صادق حسینی‌کیا