تست الک (Elek): اصول، روش استفاده و نتایج

تست الک چیست؟

تست الک (Elek) آزمایشی ایمونوفیوژن (ایمونودیفیوژن) در شرایط آزمایشگاهی برای تشخیص سمیت سویه‌ای از کورینه باکتریوم دیفتری است. یک نوار تست از کاغذ صافی حاوی آنتی توکسین دیفتری، در مرکز پلیت آگار قرار می‌گیرد. سویه‌هایی که باید آزمایش شوند (ایزوله بیمار) و سویه‌های سمی مثبت و منفی شناخته شده نیز روی سطح آگار به صورت خطی در سراسر پلیت و با زاویه قائم نسبت به نوار کاغذی آنتی توکسین قرار می‌گیرند.

آنتی توکسین با فاصله از نوار کاغذ صافی پخش می‌شود، در حالی که سم تولید شده توسط سویه‌های تولید کننده سم، به دور از ناحیه رشد منتشر می‌شود. در منطقه هم ارزی یک خط رسوب تشکیل می‌شود.

روش انجام تست الک

1. یک تیوب از نوترینت آگار ذوب شده را با 2 میلی لیتر سرم اسب استریل مخلوط کنید.
2. تیوب را بچرخانید تا سرم و آگار مخلوط شوند و آن را تکان ندهید.
3. مخلوط را در پتری دیش استریل بریزید.
4. با استفاده از پنس با شعله ملایم، نوار کاغذ صافی آغشته به آنتی توکسین را در وسط پتری دیش قرار دهید تا به زیر سطح آگار فرو رود.
5. منتظر بمانید تا آگار سفت شود، سپس یک گوشه از درب را بردارید و اجازه دهید به مدت 30-45 دقیقه در انکوباتور خشک شود.
6. هنگامی که خشک شد، با یک سویه سم زا از C. diphtheriae با کشیدن خط تلقیح در سراسر پلیت و نوار کاغذی در زوایای قائم به نوار، انکوبه کنید.
7. این کار را در فاصله 1 اینچی از تلقیح C. diphtheriae با یک سویه آزمایشی تکرار کنید.
8. پلیت را به مدت 24 ساعت انکوبه کنید و نتایج را مشاهده کنید.

نتیجه

پس از 24 ساعت انکوباسیون در دمای 37 درجه سانتیگراد، پلیت با نور عبوری از نظر وجود خط های ریز رسوبی در زاویه 45 درجه نسبت به خطوط بررسی می‌شود.

تست مثبت: خطوط پرسیپیتین در ناحیه هم ارز تشکیل می‌شود، ارگانیسم مورد آزمایش، سمی است.

تست Elek برای نشان دادن تولید سم توسط C. diphtheriae

اگر سم تولید شود، به سمت طرفین خطوط پخش می‌شود. آنتی‌توکسین از کاغذ صافی پخش می‌شود و در جایی که سم و آنتی‌توکسین به هم می‌رسند (در منطقه هم ارز) یک خط رسوبی تشکیل می‌شود.

سویه کنترل همچنین باعث تشکیل یک رسوب می‌شود که با رسوب سویه آزمایشی ترکیب می‌شود و یک خط تشخیصی را تشکیل می‌دهد.

تصویر را ببینید و سعی کنید قبل از خواندن توضیحات زیر خودتان آن را تفسیر کنید:

1. خط 1 کنترل منفی است
2. خط 2 کنترل مثبت است
3. خط 3 یک ارگانیسم آزمایشی که سویه غیر سمی از C. diphtheriae است.
4. خط 4 یک ارگانیسم آزمایشی که سویه سمی از C. diphtheriae است.

مطالب مرتبط با تست الک:

• رادیوایمونواسی (RIA): تعریف، اساس، روش، نتایج، موارد استفاده
• رنگ آمیزی سابین-فلدمن (Sabin-Feldman dye test): اصول و محدودیت‌ها
• تست فهلینگ (Fehling’s Test): تعریف، اصول، روش، نتیجه و موارد استفاده
• تست مونواسپات: اصول، روش و موارد استفاده
• تست ساتلیتیسم (Satellitism Test): اصول، محیط، روش انجام، نتایج و موارد استفاده

مترجم: معصومه قریبی ششده

 منبع