تکنیک ها
تکنیک ارزیابی مقدار کپی DNA میتوکندری
شماره کپی DNA میتوکندری، به اندازه گیری تعداد ژنوم میتوکندری در هر سلول گفته می شود، یک اقدام برای بررسی عملکرد میتوکندری بوده و با چندین بیماری مرتبط با پیری همراه است. اگرچه real time PCR (qPCR) یک روش کمی استاندارد برای اندازه گیریmtDNA است، mtDNA همچنین می تواند از طریق بررسی شدت پروب و تعیین تعداد توالی DNA اندازه گیری شود.
اختلال عملکرد میتوکندری مدت ها است طولانی شناخته شده و نقش مهمی در ابتلا به بیماریهای مرتبط با پیری، از جمله بیماری قلبی عروقی (CVD) ، اختلالات عصبی و سرطان بازی می کند. به عنوان یک متد قابل اندازه گیری و در دسترس برای عملکرد میتوکندری، تعداد کپی DNA میتوکندری (mtDNA-CN) به طور فزاینده ای برای ارزیابی نقش میتوکندری در بیماری استفاده می شود.
چندین مطالعه مبتنی بر جمعیت نشان داده اند که سطح بالاتری از mtDNA-CN با کاهش بروز CVD وبیماری هایی مانند بیماری عروق کرونر (CAD) و سکته مغزی و همچنین اختلالات عصبی مانند پارکینسون و آلزایمر و چندین نوع سرطان از جمله پستان، کلیه، کبد و کولورکتال همراه است.
اندازه گیری mtDNA-CN
qPCR
MtDNA-CN با استفاده از multiplexed real time qPCR همانطور که قبلاً توضیح داده شد، تعیین می شود. DNA موجود در نمونه استخراج شده، سپس توسط real time PCR و پرایمر DNA موجود در میتوکندری، می توان میزان بیان این ژن را در نمونه ها بررسی کرد. به طور خلاصه، آستانه چرخه (Ct) یک هدف خاص میتوکندری (ND1) و هدف هسته ای (RPPH1) در سه تکرار برای هر نمونه مشخص شد. تفاوت در مقادیرCt (ΔCt) هر تکرار نشان دهنده یک اندازه گیری نسبی خام mtDNA-CN است.
برای مطالعه سایر تکنیک آزمایشگاهی کلیک کنید.
برای سفارش خدمات به آزمایشگاه ژنتیک مولکولی ژنیران اینجا کلیک کنید
برای مشاهده و ثبت نام در دوره آموزشی ژنتیک مولکولی اینجا کلیک کنید
