خدمات بیسولفیت کردن DNA

آزمایشگاه ژنیران در راستای خدمت به دانشجویان، محققین و سایر مراکز علمی جهت به انجام رساندن امور پژوهشی خود، خدمات بیسولفیت کردن DNA را ارائه می کند. آزمایشگاه ژنیران بیسولفیت کردن کردن DNA را جهت بررسی الگوی متیلاسیون با بهترین مواد، در کمترین زمان، قیمت دانشجویی و حساسیت بالا به انجام می رساند.

متیلاسیون DNA یکی از تغییرات اپی ژنتیکی بسیاری کلیدی تاثیر گذار در کنترل بیان ژن و به تبع آن در تکوین جنین، ایجاد شرایط ناهنجاری های متفاوت و بیماری های نظیر سرطان است.

از این رو مطالعه الگوی متیلاسیون یک لوکوس خاص در نمونه های مورد مطالعه از اهمیت ویژه برخوردار است. تیمار نمونه ها با سدیم بیسولفیت و سپس استفاده از این نمونه های در آزمایش MSP یا HRM از روش های بسیار دقیق و حساس مطالعه الگوی متیلاسیون است.

🔴 زمان تحویل: یک روز کاری 🔴 نحوه محاسبه قیمت:

نحوه‌ی تحویل پروژه:

  • پس از انجام تیمار بیسولفیت، نتیجه ارزیابی کمی با استفاده از اسپکتروفوتومتری ارائه می شود (تیمار بیسولفیت نمونه های مختلف با استفاده از کیت های بیسولفیت از بهترین برندهای دنیا انجام می شود).

خدمات جانبی:

آزمایشگاه ژنیران با توجه به دارا بودن امکانات و تجهیزات کافی در زمینه ژنتیک مولکولی، علاوه بر خدمات بیسولفیت کردن DNA، خدمات استخراج DNA و همچنین بررسی متیلاسیون ژن ها با روش های MSP و HRM و نیز آنالیز پیشرفته دیتای حاصل از این آزمایش ها برای محاسبه وضعیت متیلاسیون لوکوس مورد مطالعه ارائه می کند.

تجهیزات مرتبط با بیسولفیت کردن DNA

روش کار بیسولفیت کردن DNA:

در روش بیسولفیت کردن DNA، قطعه مورد بررسی بایستی توالی یابی شود. در ابتدای کار توالی DNA استخراجی به وسیله ی بیسولفیت تیمار می شود و در مرحله ی بعد برای اطراف جزیره CpG پرایمر طراحی می شود و در نهایت قطعه توسط پرایمرهای طراحی شده تکثیر شده و توالی یابی می شود.

در رابطه با متیلاسیون DNA بیشتر بدانیم …

متیلاسیون DNA که عموما در محل C5 در سیتوزین در دی نوکلئوتیدهای CpG انجام می شود در بسیاری از فرایندهای زیست شناسی از قبیل بیان ژن، تکوین جنین، تکثیر سلول ها، تمایز و پایداری کروموزوم حائز اهمیت است. متیلاسیون غیرمعمول DNA عموما منجر به از بین رفتن هومئوستازی DNA و ناپایداری ژنومیک می شود.

چنین پیامدهایی می تواند در نهایت باعث بروز بیماری هایی نظیر سرطان شود. اهمیت بسیار بالای متیلاسیون DNA می طلبد که روش های حساس و موثری برای اهداف تشخیصی و درمانی طراحی شود. توالی یابی ژنومی بیسولفیت به عنوان یک استاندارد طلایی در آنالیز متیلاسیون DNA به حساب می آید. اساس این روش تفاوت واکنش آمیناسیون سیتوزین و 5-متیل سیتوزین(5mC) در معرض سدیم بیسولفیت است.

در این واکنش، سیتوزین در یک DNA تک رشته ای به یوراسیل تبدیل شده و در واکنش PCR و در توالی یابی به عنوان باز تیمین شناخته می شود، در حالیکه 5mC تحت تاثیر این واکنش قرار نمی گیرد و در واکنش های بعدی همچنان به عنوان سیتوزین سناخته می شود.

بدین ترتیب سیتوزین های متیله شده از سیتوزین های غیر متیله شده تمایز داده می شود. پس از انجام واکنش بیسولفیت، وضعیت متیلاسیون یک لوکوس خاص را می توان در یک واکنش PCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی متیلاسیون(MSP) ارزیابی کرد.

در هنگام انجام واکنش بیسولفیت، باید چند نکته را در نظر داشت. واکنش بیسولفیت، یک واکنش خشن برای DNA است که هم ویژگی های شیمیایی و هم ویژگی های فیزیکی DNA را تحت تاثیر قرار می دهد.

DNA اولیه که وارد واکنش می شود، از یک مولکول بزرگ و پایدار دورشته ای، به مجموعه ای از قطعات DNA تک رشته ای که تقریبا تمام سیتوزین های آن ها به یوراسیل تبدیل شده، تغییر می کند. این تغییرات بر شاخصه های کمی و کیفی و تکثیر DNA بیسولفیت شده تاثیر می گذارد. DNA بیسولفیت شده در هنگام اندازه گیری با نانودراپ باید به عنوان RNA اندازه گیری شود.

مطالعه بیشتر در ncbi

4 دیدگاه در “خدمات بیسولفیت کردن DNA

  1. کاربر ژنیران میگوید:

    از چه کیتی برای بی سولفیت استفاده می کنید
    قیمت هر نمونه را هم بفرمایید

  2. کاربر ژنیران میگوید:

    سلام
    از چه کیتی برای بی سولفیت کردن استفاده می کنید؟
    هزینه هر نمونه را هم بفرمایید.

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *