ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها
رنگ Luxol fast blue stain چیست؟
رنگ Luxol fast blue که به اختصار LFB نامیده می شود، رنگی است که از آن برای مشاهده میلین در زیر میکروسکوپ نوری مورد استفاده قرار می گیرد و توسط هاینریش کلور و الیزابت باررا در سال 1953 ایجاد شد. اما نمی تواند میلین های سیستم عصبی محیطی شناسایی کند.
روش کار
Luxol fast blue یک رنگ فتالوسیانین مس است که در الکل محلول است و به بازهای موجود در لیپوپروتئین های غلاف میلین جذب می شود.
در زیر رنگ، الیاف میلین به رنگ آبی، نوروپیل ها به رنگ صورتی و سلول های عصبی بنفش دیده می شوند. برش های بافتی برای مدت طولانی (معمولاً یک شب) در محلول رنگی می مانند و سپس با محلول کربنات لیتیوم افتراق داده می شوند.
پروسه رنگ آمیزی
| 1 | دپارافینه کردن | زایلن | 3 بار تعویض، هر کدام 10 دقیقه | |
| 2 | زایلن زدایی | اتانول 100 % | 3 بار تعویض، هر کدام 5 دقیقه | |
| 3 | آب دهی | اتانول 95 % | 5 دقیقه | |
| 4 | رنگ آمیزی * | محلول luxol fast blue 0.1 % | انکوباسیون شبانه در 50 درجه سانتی گراد | |
| 5 | آب کشی | اتانول 95 % | 1 دقیقه | |
| 6 | شست و شو | آب لوله کشی | ||
| 7 | تمایز | لیتیم کربنات 0.05 % | 5 الی 20 ثانیه | |
| 8 | تمایز | اتانول 70 % | 3 بار تعویض، در ظرف اول و دوم 1 دقیقه و در ظرف سوم به مدت 1 الی 10 دقیقه | |
| 9 | بررسی میکروسکوپی | تکرار مراحل 7 و 8 تا ماده طوسی به رنگ سفید در بیاید | ||
| 10 | شست و شو | آب لوله کشی | ||
| 11 | آب گیری | اتانول 70 %
اتانول 95 % |
هر کدام 5 دقیقه | |
| 12 | آب گیری | اتانول 100 % | 3 بار تعویض، هر کدام 5 دقیقه | |
| 13 | پاکسازی | زایلن | 3 بار تعویض، هر کدام 10 دقیقه | |
| 14 | قرار دادن لامل | |||
ملاحظات مهم در مورد رنگ آمیزی LFB
* رنگ آمیزی
- پس از رنگ آمیزی LFB، نمونه را به دمای اتاق برسانید و سپس مرحله بعد را شروع کنید.
* شستشو
- هر بار یک برش را در ظرف محلول تمایز قرار دهید.
- برش را با یک سوزن جدا کننده در محلول هم بزنید.
* تمایز
- هر بار یک برش را در محلول تمایز قرار دهید.
- برش را با یک سوزن جدا کننده در محلول هم بزنید.
- اولین ظرف به سرعت کثیف می شود. بنابراین، وقتی رنگ آن تیره شد، آن را با محلول جدید جایگزین کنید.
- برش را در ظرف سوم بگذارید تا ماده خاکستری آن بی رنگ شود.
- ظرف سوم را در حین انجام رنگ آمیزی تکان دهید.
- در صورت نیاز به افتراق بیشتر، مرحله ⑦ و ⑧ را مجددا تکرار کنید.
- تمایز زیاد یا خیلی کم به ترتیب باعث ایجاد مثبت کاذب و منفی کاذب می شود بنابراین باید ملاحظات لازم را به عمل آورید.
متد ترکیبی
ترکیبی از LFB با سایر روش های معمول رنگ آمیزی است تا مفیدترین و مطمئن ترین روش را برای نشان دادن فرآیندهای آسیب شناختی در CNS فراهم می کند. این ترکیب اغلب با رنگ H&E (هماتوکسیلین و ائوزین) انجام می شود که به اختصار H-E-LFB یا H & E-LFB نامیده می شود. از دیگر روش های معمول رنگ آمیزی می توان به روش periodic acid-Schiff، Oil Red O، اسید فسفوتونژستیک و نیترات نقره هولمز اشاره کرد.
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
