راهنمای خرید رده سلولی 4T1

رشد تومور و گسترش متاستاتیک سلول‌های 4T1 در موش‌های BALB/c بسیار شبیه سرطان سینه انسان است. رده سلولی 4T1 مشتق از تومور یک مدل حیوانی برای مرحله چهارم سرطان سینه انسان است. تومورهای ناشی از 4T1 را می توان به عنوان یک مدل بعد از عمل و همچنین یک مدل غیرجراحی استفاده کرد زیرا تومور ناشی از 4T1 به طور خود به خود در هر دو مدل با سینتیک مشابه متاستاز می کند.

سطح ایمنی زیستی: BSL1 (بیشتر بدانید)

کاتالوگ انگلیسی ATCC رده سلولی 4T1

جهت خرید یا مشاوره با ما تماس بگیرید

رویه ارسال سفارشات

حجم فلاسک

صاف

شناسه محصول: نامعلوم دسته: رده سلولی

رده محصولات	سلول های حیوانی
ارگانیسم	انسان خردمند، انسان
کلاس بندی	یوکاریوتها، جانوران، متازوآ، مهره‌داران، چهارپایان
مورفولوژی	اپی تلیال
بافت	پستان، غدد پستان
بیماری	تقلید سرطان پستان گرید 4
کاربردها	کشت سلولی سه بعدی
شرایط نگهداری	فاز بخار نیتروژن مایع

عمومی:

استفاده در نظر گرفته شده

رشد تومور و گسترش متاستاتیک سلول‌های 4T1 در موش‌های BALB/c بسیار شبیه سرطان سینه انسان است. این تومور یک مدل حیوانی برای مرحله چهارم سرطان سینه انسان است.

تومورهای ناشی از 4T1 را می توان به عنوان یک مدل پس از عمل و همچنین یک مدل غیر جراحی استفاده کرد زیرا تومور ناشی از 4T1 به طور خود به خود در هر دو مدل با سینتیک مشابه متاستاز می کند.

حجم فلاسک	T25, T75

خصوصیات

خصوصیات رشد	چسبنده
استخراج	4T1 یک رده سلولی مقاوم به 6 تیوگوانین است که از تومور 410/4 بدون درمان موتاژن انتخاب شده است.
نژاد	BALB/cfC3H
تومورزایی	بله، در موش BALB/c تومور ایجاد می کند و متاستاز می دهد
نظرات	هنگامی که 4T1 به موش‌های BALB/c تزریق می‌شود، به‌طور خود به خود تومورهای متاستاتیکی تولید می‌کند که می‌توانند به ریه، کبد، غدد لنفاوی و مغز متاستاز دهند در حالی که تومور اولیه در محل رشد می‌کند. لازم نیست تومور اولیه برای القای رشد متاستاتیک برداشته شود. از آنجایی که 4T1 در برابر 6-تیوکوانین مقاوم است، سلول های میکرو متاستاتیک (به تعداد 1 عدد) را می‌توان در بسیاری از اندام های دوردست با دقت بهتری نسبت به اکثر مدل های تومور تشخیص داد. نیازی به شمارش گره ها یا وزن اندام های هدف نیست.

اطلاعات نگهداری

دستورالعمل باز کردن و ذخیره سازی

1- تمام ظروف را از نظر نشتی یا شکستگی بررسی کنید.

2- سلول های یخ زده را از بسته بندی یخ خشک خارج کرده و بلافاصله سلول ها را در دمای زیر 130- درجه سانتی گراد ترجیحاً در بخار نیتروژن مایع قرار دهید تا آماده استفاده شود.

محیط کامل

محیط پایه برای این رده سلولی RPMI-1640 Medium

برای ساختن محیط رشد کامل، سرم جنین گاوی به غلظت نهایی 10% را به محیط پایه اضافه کنید.

درجه حرارت

37 درجه

شرایط نگهداری

برای اطمینان از بالاترین سطح زنده ماندن، ویال را ذوب کرده و در اسرع وقت پس از دریافت، کشت را آغاز کنید. اگر در بدو ورود، ادامه نگهداری کشت منجمد ضروری باشد، باید در فاز بخار نیتروژن مایع و نه در دمای 70- درجه سانتی گراد نگهداری شود. نگهداری در دمای -70 درجه سانتیگراد باعث از بین رفتن قابلیت زنده ماندن می شود.

1- ویال را با هم زدن ملایم در حمام آب 37 درجه سانتی گراد ذوب کنید. برای کاهش احتمال آلودگی، O-ring و کلاهک را خارج از آب نگه دارید. ذوب شدن باید سریع باشد (تقریباً 2 دقیقه).

2- به محض ذوب شدن محتویات، ویال را از حمام آب خارج کرده و با غوطه ور کردن یا پاشیدن با اتانول 70 درصد آن را ضدعفونی کنید. تمام عملیات از این نقطه به بعد باید در شرایط سخت اسپتیک انجام شود.

3- محتویات ویال را به یک فلاسک کشت بافت 75 سانتی متر مربعی منتقل کنید و با محیط کشت کامل توصیه شده رقیق کنید (اطلاعات دسته ای خاص را برای نسبت رقت توصیه شده ببینید). مهم است که از قلیایی بودن بیش از حد محیط در طول بازیابی سلول ها جلوگیری شود. پیشنهاد می شود، قبل از افزودن محتویات ویال، ظرف کشت حاوی محیط رشد حداقل به مدت 15 دقیقه در انکوباتور قرار داده شود تا محیط به pH طبیعی خود (7/0 تا 7/6) برسد.

4- کشت را در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور مناسب انکوبه کنید. در صورت استفاده از محیطی که در این برگه محصول توضیح داده شده است، CO2 5٪ در جو هوا توصیه می شود.

اگر مایل هستید که عامل محافظ انجماد فوراً حذف شود یا سوسپانسیون سلولی غلیظ تری به دست آید، سوسپانسیون سلولی را در حدود 125 x g به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع رویی را دور بریزید و سلول ها را با محیط رشد تازه با نسبت رقت توصیه شده در اطلاعات دسته خاص، مجدداً معلق کنید.

روش پاساژ دادن

حجم ها برای یک فلاسک 75 سانتی متر مربع داده شده است. مقدار محیط تفکیک مورد نیاز را متناسب با ظروف کشت با اندازه های دیگر افزایش یا کاهش دهید.

1- محیط کشت را بردارید و دور بریزید.

2- به طور خلاصه لایه سلولی را با محلول 0/25% تریپسین و 0/53 میلی مولار EDTA شستشو دهید تا تمام آثار سرمی حاوی مهارکننده تریپسین پاک شود.

3- 2 تا 3 میلی لیتر محلول Trypsin-EDTA را به فلاسک اضافه کنید و سلول ها را زیر میکروسکوپ معکوس مشاهده کنید تا لایه سلولی پراکنده شود (معمولاً در عرض 5 تا 15 دقیقه).

توجه: برای جلوگیری از انباشته شدن، سلول ها را با ضربه زدن یا حرکت دادن فلاسک تکان ندهید در حالی که منتظر جدا شدن سلول ها هستید. سلول هایی که به سختی جدا می شوند ممکن است در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده شوند تا پراکندگی آنها تسهیل شود.

4- 6 تا 8 میلی لیتر از محیط رشد کامل را اضافه کنید و سلول ها را با پیپت کردن به آرامی آسپیره کنید.

5- مقدار مناسبی از سوسپانسیون سلولی را به رگ های کشت جدید اضافه کنید.

کشت ها را در غلظت سلولی بین 10⁴×1 و 10⁵×2 سلول در سانتی متر مربع نگهداری کنید.

6- کشت ها را در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید.

نسبت پاساژ: 1:6 و 1:8 توصیه می شود.

تعویض محیط: هر 2 تا 3 روز

معرف برای انجماد

95% محیط کامل + 5% v/v DMSO