پرسش های متداول:
1-رنگ فلورسانس SYBR Green چیست؟ / 3- دستگاههای ریل تایم PCR به صورت چند گانه هستند؟/ 2- پرایمرهای پروب / 4- انواع برند:
1-رنگی است که توانایی اتصال مولکولهای دو رشته ای DNA را دارد و با وجود این ماده دستگاه ریل تایم قادر است در انتهای هر چرخه توالی مقداری amplify شدن DNA را اندازه گیری و ارائه دهد. مسترمیکس سایبر گرین حاوی Mgcl2 ، dNTP، Rcl هات استارت تک (hotstsrt taq DNA) رنگ سایبر گرین بهینه شده می باشد.
2-Taq : از یک پروب اسیدنوکلئیک ساخته شده که به مولکول های quender, Reporter می باشد. این پروب توانایی اتصال به 5’ 3’ و 3’ 5’ DNA را دارد. در طی مراحل پروب تخریب شود. مولکول Reporter را آزاد کرده تا اجازه شناسایی فلورسانس بدهد.
4- شرکتهای متعددی در دنیا وجود دارند که دستگاه ریل تایم PCR با مدلها و طراحیهای مختلف تولید می کنند: مانند دستگاه ABI که ساخت آمریکا میباشد و اساس کار آن به صورت گرمادهی پلیتی می باشد.
دیگر برندهای مانند ABI مثل رُش (ROCH) ساخت کشور آلمان Langgene ساخت کشور چین و …..
شرکت کوربت که در حال حاضر توسط روتورژن آلمان تولید میشود که اساس آن به صورت گرمادهی نقطهای در روتور میباشد.
1-پرایمرها چگونه طراحی میشوند؟ در طی اتصال پرایمرها به دمای ذوب هر دو پرایمر R و F بستگی دارد. بدین معنا که باید مشابه باشد. از روش بلاست (BLAST) و سایر نرم افزارهای دیگر می توان پرایمر را طراحی نمود.