از دستگاه نانودراپ در جهت سنجش غلظت اسیدهای نوکلئیک استفاده میشود. که با کم ترین میزان حجم یک میکرولیتر برای خوانش توسط نانودراپ کافی است. و برای تکنیکهای آزمایشگاه با حجم کم دیگر نیازی به کووت نمیباشد. لامپ زنون فلش منبع نور دستگاه بوده و طول موج 190 تا 840 نانومتر تاباند. از خصوصیات کاربردی این دستگاه توانایی سنجش cypye در پروپها میباشد و در زمان کوتاه با مقدار یک میکرولیتر توانایی خوانش غلظت DNA را دارد. که در واقع نوعی اسپکتوفوتومتر است بر پایه تکنیک تابش نور و میزان جذب نوری میباشد. عملکرد نانودراپ در سنجش:
1-تعیین غلظت RNA و DNA
تبیین میزان آلودگی اسیدنوکلئیک استخراج شده
اندازه گیری میزان پروتئین
دارای سیستم مانیتورینگ و cpu برای تحلیل دادهها
عیب یابی اجزای فیزیکی نانودراپ
ذخیره دادهها با تکنیک جذب طول موج در نانومتر
دستگاه نانودراپ طبق قانون بیرلامبرت برای دستیابی به غلظت ماده عمل میکند. که محاسبه جذب نوری با شیب جذب ماده حل شونده و طول ظرف نمونه میباشد. البته این را باید در نظر داشت که دو ماده با طول موج متفاوت را نمیتوان در دستگاه نانودراپ به صورت هم زمان قرار داد. نانودراپها به صورت نمونههایی مانند thermo6 هست و بابت هر بار استفاده بایستی بلانک کرد و نانودراپهای الایزاریدری دارای پلیت میباشد و توانایی خوانش غلظت هم زمان 8 ماده را دارد.
روش استفاده از دستگاه: پس از اتصال دستگاه توسط کابل به لپ تاپ که نرم افزار در آن از نصب شده است. بایستی نوع ماده مورد سنجش را انتخاب کرد پس با حلالی که آن را به حجم رساندهاید بلانک کرده و بعد یک میکرولیتر از ماده را جهت تابیدن طول موج مربوط به روی محل تعیین شده دستگاه بریزید و سپس غلظت میزان آلودگی و طول موج بر شیب جذب را قرائت کنید.
1-آیا دستگاه غیر از نانودراپ میتوان غلظت RNA را خوانش کرد؟ برای خوانش غلظت RNA تنها میتوان از دستگاه الایزایی که دارای فیلتر UN با طول موج مربوطه باشد استفاده نمود تا غلظت را بتوان قرائت کرد. این حالت تک کابردی می باشد و برای آزمایشگاههایی که تنها غلظت RNA را نیاز دارند مقرون به صرفه و کافی می باشد.
2-نانودراپ چگونه بلنک (Blank) میشود؟
برای خوانش غلظت ها توسط نانودراپ ابتدا بایستی توسط حلالی در پایان پروتکل که به محلول اضافه شده . برای مثال: آب دیونایز، دپس (DEPC)
آب RNase Free/ DNase و …. استفاده کرد.
Reviews
There are no reviews yet.