محیط کشت dmem:
DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) یک محیط بازال پرکاربرد برای حمایت از رشد بسیاری از سلولهای مختلف پستانداران است. سلولهایی که با موفقیت در این محیط، کشت داده میشوند شامل فیبروبلاستهای اولیه، سلولهای عصبی، سلولهای گلیال، HUVECs و سلولهای عضلانی صاف و همچنین ردههای سلولی مانند HeLa، 293، Cos-7، و PC-12 هستند.
این محصول اصلاح شده پایه متوسط (BME) است که حاوی چهار برابر آمینو اسیدها و ویتامین ها است. علاوه بر این، فرمول همچنین شامل گلیسین، سرین و نیترات آهن است. فرمول اولیه حاوی 1000 میلی گرم در لیتر گلوکز است و در ابتدا برای کشت سلول های جنینی موش استفاده شد.
این محصول چهار برابر ویتامینها و اسیدهای آمینه و دو تا چهار برابر، گلوکز بیشتری نسبت به EMEM دارد. ترکیب DMEM آن را به یک مکمل ایده آل برای اکثر کشت های سلول تبدیل می کند. این محیط کشت از نظر انواع مواد مغذی غنی تر از MEM است و انتخاب بسیار خوبی برای بسیاری از انواع سلول است. سلول ها سریعتر رشد می کنند و محیط را در DMEM کندتر تخلیه می کنند.
PH متوسط XF DMEM با pH 7.4 با 5 میلیمولار HEPES فرموله شده و از قبل روی pH 7.4 تنظیم شده است. بنابراین، هنگام استفاده در شرایط توصیه شده، نیازی به تنظیم pH محیط سنجش نهایی (به عنوان مثال محیط + مکمل ها) وجود ندارد. بسیاری از محیط های کشت نشانگر pH قرمز فنل به آنها اضافه شده است.
اگر مقدار pH 7.4 باشد، محیط کشت قرمز می شود. با 40 میکرومولار فنل قرمز در DMEM، محیط زمانی که مقدار pH افزایش مییابد تغییر رنگ میدهد و در pH 7.6 صورتی و در 7.8 بنفش میشود. مدت زمانی که می توان DMEM را در دمای اتاق (25-20 درجه سانتیگراد) نگه داری نمود به مدت 13 ماه می باشد.
این محلول را در فریزر هم می توان منجمد نمود اما بهتر است در مقادیر کمی ذخیره شود و هیچ گونه چرخه ذوب انجمادی انجام نشود زیرا در صورت نگهداری طولانی مدت در دمای 20- یا در صورت انجام چرخه های انجماد و ذوب، امکان غیرفعال شدن برخی از اجزا وجود دارد.
این محیط به طور گسترده در کشت سلولی به عنوان یک محیط پایه استفاده می شود. این مواد مغذی اساسی را برای رشد رده های سلولی مختلف پستانداران فراهم می کند، به ویژه هنگامی که با FBS مکمل شود. این محصول در فرمولهای مختلفی عرضه میشود که ترکیب اجزا ممکن است متفاوت باشد. فرمول اصلی DMEM حاوی 1.0 گرم در لیتر است.
این محصول – DMEM High Glucose – دارای محتوای گلوکز افزایش یافته 4.5 گرم در لیتر است و با ال-گلوتامین تکمیل شده است. یک روش بسیار رایج، مکمل DMEM با FBS است، معمولاً در غلظت 10٪. این اغلب ضروری است زیرا محیط حاوی هیچ هورمون رشد، لیپید یا پروتئینی نیست که برای رشد سلول ضروری است.
دو نسخه از DMEM وجود دارد:
* محتوای گلوکز بالا (4.5 گرم در لیتر) به خوبی برای سلول های سوسپانسیون با چگالی بالا مناسب است.
* محتوای گلوکز کم (1.0 گرم در لیتر) ایده آل برای سلول های وابسته چسبنده.
Reviews
There are no reviews yet.