راهنمای خرید کلسمید (Colcemid)
کلسمید در تجزیه و تحلیل کروموزوم در طول کاریوتایپینگ لنفوسیت و در تجزیه و تحلیل کروموزوم سلولی مایع آمنیوتیک با جلوگیری از تشکیل دوک در طول میتوز، که باعث توقف متافاز می شود، استفاده می شود. و همچنین در تجزیه و تحلیل کروموزوم سلول های خون محیطی و مغز استخوان نقش دارد.متافاز فاز بهینه میتوز برای مشاهده میکروسکوپی کروموزوم ها است.
Colcemid یک مهارکننده میتوز است. این می تواند تشکیل فیبر دوک را غیرفعال کند. به پروتئین توبولین متصل می شود و در نتیجه از تشکیل الیاف دوک جلوگیری می کند. همچنین می تواند آنهایی را که قبلاً تشکیل شده اند از بین ببرد.
فرمول مولکولی آن ، C21H25NO5 و دارای وزن مولکولی 371.4 میباشد. قرار گرفتن مداوم در معرض غلظتهای کلسمید کافی برای مسدود کردن سلولها در نقطه بازرسی میتوزی منجر به ظهور سلولهای آپوپتوز تقریباً یک چرخه سلولی پس از تجمع اولیه آنها در میتوز میشود. کلسمید مربوط به کلشی سین است اما کمتر سمی است و به عنوان ضد نئوپلاستیک استفاده می شود.
محلول Colcemid از صنایع بیولوژیکی در سالین بافر فسفات (PBS) تهیه می شود و توصیه می شود از غلظت 0.1 میکروگرم بر میلی لیتر در محیط کشت استفاده شود.طی تحقیقات مختلف، شواهد نشان داده است که1- فعال شدن p53 همچنین در پاسخ به عواملی مانند کلسمید، نوکودازول و تاکسول رخ می دهد که چسبندگی سلولی یا ساختار میکروتوبول و دینامیک را از بین می برد.
2- تحت شرایط کشت محدود، رشد و تقسیم ساکارومایسس سرویزیه توسط داروی ضدمیتوتیک کلسمید مهار میشود و همچنین ، ماده اتصال دهنده کلسمید در سلول های S. cerevisiae به طور موقت به عنوان زیر واحدهای میکروتوبول شناسایی شد.3- کلسمید با مسدود کردن میتوز در سلول های HeLa S3 باعث آپوپتوز می شود.
دمکولسین اسید به محل اتصال توبولین به کلشی سین متصل می شود و از پلیمریزاسیون آن به میکروتوبول ها جلوگیری می کند و باعث توقف چرخه سلولی در متافاز می شود و از تقسیم سلولی جلوگیری می کند. Colcemid یک آلکالوئید و یک ترکیب آمینه ثانویه است. دمکولسین یک ترکیب آمینه ثانویه است که (S)-کلشی سین است که در آن گروه N-استیل با یک گروه N-متیل جایگزین شده است.
Demecolcine یک محصول طبیعی است که در Colchicum alpinum، Colchicum arenarium و سایر موجودات با اطلاعات موجود یافت می شود. همگام سازی سلولی محلول کلسمید به تعیین شاخص فعالیت میتوزی برای مطالعات همگام سازی سلولی کمک می کند. نشان داده شده است که کلسمید سلول های HeLa و CHO را در غلظت های 0.05 – 0.5 میکروگرم در میلی لیتر مهار می کند.
قرار گرفتن طولانیتر در معرض کلسمید به این معنی است که سلولهای متافاز بیشتری ممکن است جمعآوری شوند، با این حال، ممکن است منجر به جمعآوری کروموزومهای کوتاهتر نیز شود، زیرا کروموزومهای دوم با عبور از متافاز متراکم میشوند.
تحقیقات مختلف نشان داد که هنگامی که با Colcemid در غلظت های کمتر از 0.01 میکروگرم در میلی لیتر از ابتدای کشت تیمار میشوند، کشت های برداشت شده در 48 ساعت دارای شاخص های میتوزی پایین بودند.
تیمار کلسمید با غلظت 0.025 تا 0.05 میکروگرم در میلی لیتر طی 48 ساعت منجر به شاخص های میتوزی بالا (8 تا 15 درصد) و باقی ماندن تقریباً سلول های میتوزی در تقسیم سلولی شد که نشان میدهد این محدوده از غلظت کلسمید برای درمان مداوم با کلسمید مناسب است.
آزمایشهای مکرر نشان داد که بازده حلقههای دیسانتریک و مرکز در کشت دارای Colcemid در غلظت 025/0 میکروگرم بر میلیلیتر از 05/0 میکروگرم بر میلیلیتر بود. این داده ها اهمیت اطمینان از دقت غلظت کلسمید در کشت لنفوسیت را برای دزیمتری تابش سیتوژنتیک نشان می دهد.
مشاهده لیست کامل مواد آزمایشگاهی
Reviews
There are no reviews yet.