اسپکتروفتومتر

اسپکتروفتومتر یا طیف سنج که شدت نور را به صورت طول موج اندازه گیری می­کند. اساس کار آن بدین صورت است که مقدار ماده یا غلظت آن با تابش الکترومغناطیسی مشخص می­شود. به دلیل توانایی در اندازه گیری غلظت های کوچک در DNA و RNA کاربرد دارد. اگر ماده جامد باشد. باید در حلال شفاف حل شود تا غلظت ماده مشخص شود.

این دستگاه از طریق دو منبع می تواند نور ساطع و تولید کند. اگر نور مرئی و مادون قرمز باشند (طول موج 1100-320 نانومتر) از لامپ های هالوژن یا تنگستن استفاده شده اگر امواج فرابنفش باشد از لامپ دوتریوم استفاده می شود. (طول موج 320-190 نانومتر)

سوال: 1-طبقه بندی دستگاه های اسپکتروفتومتری به چه صورت است؟

دارای 2 طبقه بندی اساسی از نظر تک پرتو و دو پرتو می باشد.

2-تفاوت طبقه بندی دستگاه در چیست؟ دو پرتویی: شدت نور بین دو مسیر مرجع و نمونه آزمایش را مشخص می کند ولی تک پرتو با شدت نور نسبی.

با استفاده از مونو کروماتور­ها می توان نورهای این لامپ ها را فیلتر نمود.

دستگاه دارای اجزای متفاوتی می­باشند:

1-لامپ اسپکتروفتومتر: نقش منبع نور در دستگاه می باشد.

2- سیستم کنترل ولتاژ: شدت نور خروجی از لامپ باید ثابت باشد.

3- مونوکروماتور: تبدیل به پرتوهای تک رنگ توسط نور ایجاد شده لامپ.

4-سیستم گریتینگ: باعث ایجاد طیف خطی یا موازی می­شود.

نکته: منشورها در این دستگاه به علت تفاوت در ضریب شکست باعث تجزیه نور می­شوند.

تبدیل انرژی نورانی به الکتریکی توسط آشکارساز دستگاه ایجاد می­شود.

در نهایت مفسر دستگاه، نموداری ترسیم می­کند که شدت نور بر حسب میزان جذب نور می­سنجد.

3-جذب یا انتقال ماده در این دستگاه از طریق چه رنگ­هایی قابل مشاهده می باشد؟

نمونه محلول که نمی­تواند هیچ یک از طول موج مرئی را از خود عبور دهد و در واقع نور در بالاتر از طیف مرئی وجود دارد را به رنگ سیاه نشان می­دهد در غیر این صورت نمونه محلول به صورت سفید رنگ می باشد.