عملکرد دستگاه سانتریوفیوژ به صورت جداسازی ترکیبات بر اساس وزن مولکولی با به کار گیری نیروی گریز از مرکز میباشد. این دستگاه با چرخاندن مواد در سرعتهای بالا موجب جداسازی ترکیبات میشود. در نتیجه باعث ایجاد فازهای جدا از هم میشود. محلول میتواند مخلوطی از 2 مایع یا جامد در مایع باشد. فاز جامد به شکل رسوب و فاز مایع بالای آن قرار می گیرد. سلولها دارای مولکولهای اصلی از جمله: لیپیدها، کربوهیدراتها، پروتئینها و اسیدهای نوکلئیک می باشند که با استفاده از این دستگاه در دورهای مختلف، هر یک از آنها را جدا کرد.
این دستگاه معمولا دارای سرعت و زمان چرخش قابل تنظیم میباشند. سرعت با 2 واحد Rpu و RCF معرفی میشود که RPM به معنای تعداد دورهایی است که روتور سانتریفیوژ در یک دقیقه می زند.
RCF که به معنی نیروی نسبی سانتریفیوژ می باشد.
از نظر تقسیم بندی به 4 گروه تقسیم میشوند:
1-سانتریفیوژ معمولی دور پایین
2- سانتریفیوژ معمولی دور بالا
3-سانتریفیوژ یخچال دار دور بالا (میکروفیوژ )
4-اولتراسانتریفیوژ
سانتریوفیوژهای دارای سیستم یخچالی برای ترکیباتی که حساس به دما می باشند بسیار مناسب است مانند پروتئینها.
این دستگاه در پروسه DNA-RNA extraction کاربرد دارد به معنای چرخاندن نمونهها در حجم کم و دور بالا استفاده میشود. معمولا برای جداسازی ذرات جامد از یک مایع یا مخلوط مایعات استفاده میشود. برای استخراج RNA از بافت، سلول، خون و ….. در آزمایشگاه مولکولی بسیار پر کاربرد می باشد. پروتکل استخراج بدین صورت میباشد که نمونه پس از هموژنایز شدن و اضافه شدن بایستی در دمای 4 درجه و دور بالا (معمولا 12000) به مدت مشخص توسط دستگاه میکروفیوژ چرخانده شود تا نمونه به 3 فاز جدا شود که مایع رویی (supernant) که اسیدنوکلئریک می باشد برای ادامه پروتکل جدا میشود که پس از چند مرحله شستشو RNA خالص استخراج میشود.
Reviews
There are no reviews yet.