Pcr master mix

ماده های ترکیبی مختلف مانند آنزیم، بافر و پرایمر برای PCR بسیار کاربردی می باشد. برای در دسترس بودن راحت تر این ماده ها از مخلوط این ماده ها که به صورت محلول است به نام مسترمیکس استفاده میشود. به طور دقیق تر، مستر میکس ها شامل :  DNA polymerase ، dNTP ، بافر و Mgcl₂  می باشد. استفاده از مستر میکس ها دارای دو مزیت اصلی است. یکی کاهش مراحل حجم برداری و دیگری کاهش بروز آلودگی می باشد که در نتیجه این مزیت ها، صرفه جویی در وقت و همگن بودن معرف را می توان اشاره نمود.

نکته:

• Mgcl2 یا کلرید منیزیم در ترکیبات مستر میکس ها ، به عنوان کوفاکتور معروف می باشد که گاها هم می توان به جای آن از mgso4 یا سولفات منیزیم استفاده نمود.

امروزه انواع مختلفی از مستر میکس ها برتی دستگاه های مختلف pcr مورد استفاده قرار می گیرد که ممکن است بعضی از آنها برای استفاده نیاز به آماده سازی پیش از استفاده از مستر میکس داشته باشند به عنوان مثال مانند: ذوب ، سرد شدن و رقیق سازی با آب.

یکی از عوامل موثر در pcr ، مستر میکس دارای آنزیم Taq plus می باشد که این آنزیم با آنزیم دیگری به نام Taq DNA polymerase که دارای فعالیت اگزونوکلئازی 5—-3 می باشد مخلوط شده است که این عوامل باعث اثر بخشی زیاد مستر میکس ها در pcr می شود.