ابزار و وسایل آزمایشگاهی شامل، محلول ها کیت ها
بلاد آگار: ترکیب، مراحل آماده‌سازی، موارد استفاده
بلاد آگار (Blood Agar (BA)) محیط کشت غنی شده‌ای است که برای کشت باکتریها یا میکروب‌هایی که به راحتی رشد نمیکنند، استفاده میشود. این گونه باکتریها را ” سخت‌پسند (fastidious)” می‌نامند، زیرا در مقایسه با باکتریهای معمول، به محیط تغذیه‌ای ویژه و غنی نیاز دارند.
بلاد آگار برای رشد طیف گسترده‌ای از پاتوژنها به ویژه آنهایی که رشدشان دشوارتر است مانند هموفیلوس آنفولانزا (Haemophilus influenzae)، استرپتوکوکوس پنومونیه (Streptococcus pneumoniae) و گونه‌های نایسریا (Neisseria) استفاده میشود.
همچنین برای شناسایی و افتراق باکتریهای همولیتیک (Haemolytic) به ویژه گونه‌های استرپتوکوک (Streptococcus) ضروری است. همچنین یک محیط کشت افتراقی در تشخیص همولیز (Hemolysis) (از بین برنده گلبول‌های قرمز خون توسط سموم سیتولیتیک (Cytolytic)، ترشح شده به وسیله برخی باکتریها مانند سویه‌های خاصی از باکتریهای باسیلوس(Bacillus)، استرپتوکوک (Streptococcus)، انتروکوک (Enterococcus)، استافیلوکوک (Staphylococcus) و آئروکوک (Aerococcus)) میباشد.
بلاد آگار میتواند با افزودن آنتی‌بیوتیک‌ها، مواد شیمیایی یا رنگ‌ها، برای پاتوژن‌های خاص متمایز کننده باشد. برای نمونه می‌توان به بلاد آگار کریستال ویولت (Crystal violet) برای جداسازی استرپتوکوک پیوژن‌ها (Streptococcus pyogen) از سواب‌های گلو (Throat swab)، و بلاد آگار کانامایسین (Kanamycin) یا نئومایسین (Neomycin) برای جداسازی anaerobes از pus اشاره کرد.
ترکیبات بلاد آگار
- 5 درصد Peptone
- 3 درصد عصاره گوشت گاو یا عصاره مخمر
- 5 درصد آگار
- 5 درصد NaCl
- آب مقطر
- 5 درصد خون گوسفند
- pH باید از 7.2 تا 7.6 (حدود 7.4) باشد.
(از آنجایی که بلاد آگار از نوترینت آگار (Nutrient Agar) ساخته شده است، در بالا ترکیب نوترینت آگار آورده شده است.)
مراحل آماده سازی بلاد آگار
- 28 گرم پودر نوترینت آگار را با 1 لیتر آب مقطر ترکیب کنید.
- این مخلوط را در حین هم زدن حرارت دهید تا همه اجزا کاملا حل شوند.
- مخلوط حل شده را به مدت 15 دقیقه در دمای 121 درجه سانتیگراد در اتوکلاو (Autoclave) قرار دهید.
- پس از اتوکلاو شدن نوترینت آگار، اجازه دهید خنک شود اما جامد نشود.
- هنگامی که آگار تا دمای 50-45 درجه سانتیگراد خنک شد، 5% خون استریل دفیبرینه شده را که دمای آن به دمای اتاق رسیده است، اضافه کنید و به آرامی اما خوب مخلوط کنید.
- از ایجاد حباب‌های هوا اجتناب کنید.
- در حالی که مخلوط هنوز به صورت مایع است، آن را در پلیت‌های استریل بریزید.
موارد استفاده از بلاد آگار
- بلاد آگار یک محیط غنی شده برای اهداف مختلف است که اغلب برای رشد ارگانیسم‌های سخت‌پسند استفاده میشود.
- برای افتراق باکتریها بر اساس خواص همولیتیک آنها (β-همولیز، α-همولیز و γ-همولیز (یا غیر همولیتیک)) استفاده میشود.
تصاویر
در زیر تصاویر این محیط کشت بر اساس خواص همولیتیک آن آورده شده است:
جهت خرید و یا استعلام قیمت با ما تماس بگیرید یا در واتسپ پیام بزارید
از صفحات زیر دیدن فرمایید:
- دوره مهارت آموزی میکروبیولوژی
- آگار ستریماید (Cetrimide Agar): ترکیب، اساس، کاربردها، آماده سازی و مورفولوژی کلنی
مترجم: فاطمه فریادرس
چرا گاهی اوقات در هنگام تهیه محیط کشت بلاد آگار وبقیه ژل خوب سفت نمی شود ونرم است.
مقدار ابی که اضافه میکنید زیاد هستش شما باید پودر محیط کشت و اب مقطر رو به حجم برسونید. دلیل دیگه این هست که مثلا اگر شما برای 1 لیتر میخواهید محیط بسازید و 5 درصد خون بهش اضافه کنید باید 950 میلی لیتر محیط استریل کنید 50 میلی لیتر خون رو بعدا اضافه کنید تا خون هم به حجم برسه. اگر مشکلتون با به حجم رسوندن برطرف نشد احتمالا اگار محیط کشتتون منقضی شده میتونید 0.5 درصد پودر اگار به صورت دستی به محیط خودتون اضافه کنید
سلام وقت شما بخیر
برای تهیه بلاد آگار باید برای مثال ۱۰۰ سی سی ۹۵ سی سی محیط کشت با ۵ سی سی خون باشه
با سلام بله. به طور کلی 5 تا 10% خون دفیبرینه گوسفندی برای تهیه بلاد آگار نیاز هستش
با سلام و احترام
جهت تهیه محیط بلاد آگار به مقدار 200 سی سی باید 10 سی سی خون دفیبرینه اضافه کنیم
سلام دوست عزیز بله 10 CC